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    從原理到實操,蝦青素抗肝纖維化實驗流程!(3)

    發(fā)布時間: 2025-04-17  點擊次數(shù): 211次

    3 C57小鼠肝纖維化模型每周監(jiān)測
    在肝纖維化模型建立過程中,每周系統(tǒng)監(jiān)測小鼠的體重、活動度及毛發(fā)狀態(tài)是評估模型進展、藥物干預(yù)效果及動物福利的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。以下為具體操作流程及注意事項:


    3.1 監(jiān)測頻率與時間點

    • 監(jiān)測頻率:每周固定時間點(如每周一上午9:00-11:00)監(jiān)測1次。

    • 監(jiān)測周期:

    模型誘導期:DMN注射開始至建模完成(通常4-6周)。  

    干預(yù)治療期:給藥開始至實驗終點(通常4-8周)。  


    3.2 具體監(jiān)測方法與記錄標準

    3.2.1 體重

    操作步驟:

    1. 設(shè)備準備:使用精度0.1 g的電子天平,校準歸零。

    2. 小鼠固定:

    • 輕柔抓取小鼠尾部,將其置于專用稱量盒(底部鋪濾紙防滑)。  

    • 避免抓握腹部(可能加劇肝區(qū)疼痛)。  

    3. 稱量記錄:待數(shù)值穩(wěn)定后記錄體重(單位:g),精確至小數(shù)點后1位。

    4. 清潔消毒:每次稱量后用75%酒精擦拭稱量盒,防止交叉污染。  

    5. 計算體重變化率} (%) = - }/} * 100%

    6. 異常判定:

    • 顯著下降:連續(xù)2周體重降幅≥10%,或單周降幅≥15%。

    • 顯著上升:排除腹水后,體重增幅≥20%(可能提示代謝異常)。  


    3.2.2 活動度評估

    觀察指標:

    • 自主活動:在開放場(如30 cm×30 cm透明箱)中觀察5分鐘,記錄以下行為:

    • 水平運動:穿越區(qū)域次數(shù)(四肢全部進入新區(qū)域計1次)。  

    • 垂直探索:前肢離地站立次數(shù)(持續(xù)≥1秒)。  

    • 靜止時間:無主動移動的累計時間(秒)。  

    • 應(yīng)激反應(yīng):抓取時掙扎強度(輕度/中度/劇烈)。


    評分標準(參考改良的Murphy評分):
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    記錄與處理:

    評分≥2分且持續(xù)48小時,需考慮提前優(yōu)逝。


    3.2.3 毛發(fā)狀態(tài)觀察

    觀察指標:

    • 毛發(fā)蓬松度:正常(緊貼皮膚) vs. 蓬松(豎立如“炸毛")。

    • 光澤度:光滑有光澤 vs. 暗淡無光。

    • 脫毛區(qū)域:記錄脫毛部位(頭頸部、背部、腹部)及面積(直徑cm)。

    • 皮膚損傷:紅斑、結(jié)痂、潰瘍等。


    分級記錄:

    從原理到實操,蝦青素抗肝纖維化實驗流程!(3)


    處理措施:
    • 1級異常:加強墊料清潔,補充維生素(如飲水中添加復(fù)合維生素B)。

    • 2級異常:結(jié)合體重和活動度評估,必要時終止實驗。


    3.3 注意事項

    1. 減少應(yīng)激:

    • 固定監(jiān)測人員,操作輕柔,避免噪音干擾。  

    • 稱重與行為學觀察在不同時間段進行(如上午稱重,下午行為測試)。  

    2. 環(huán)境控制:

    維持SPF級環(huán)境(溫度22-24℃,濕度50-60%),避免環(huán)境波動影響數(shù)據(jù)。  

    3. 倫理閾值:

    體重下降≥20%、活動度評分≥2持續(xù)48小時或嚴重皮膚損傷,需立即啟動優(yōu)逝程序。  


    3.4 常見問題與解決方案

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    通過系統(tǒng)監(jiān)測體重、活動度及毛發(fā)狀態(tài),可全面評估肝纖維化模型小鼠的生理狀態(tài),為實驗結(jié)果的可靠性及倫理合規(guī)性提供保障。


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